酵母菌计数法是一种常用的 *** ,用于确定酵母菌在发酵过程中的数量。酵母菌作为一种微生物,广泛应用于食品和饮料工业中的发酵生产。酵母菌的数量对于生产质量的控制至关重要,因此准确计数酵母菌的 *** 非常重要。酵母菌计数法通过将发酵液样品稀释后接种于琼脂平板上,培养一段时间后,根据菌落的数量进行计数。这种 *** 操作简单、可靠,并能得到准确的酵母菌数量。同时,借助酵母菌计数法,可以对发酵工艺进行优化和调整,确保生产过程的稳定性和品质。
一:酵母菌计数法的 ***
第一:你可以用显微镜观察,血球计数法
*** 操作:
一、2mm×2mm方格的计数
2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。
计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
1.16×25型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数
二、1mm×1mm方格的计数
1.16×25型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
第二:选择的稀释度,做平板计数
选择适宜的稀释度,吸取1mL加入平板,注入孟加拉红培养基,29摄氏度培养5-7天,计数。
酵母总数/mL=平板数X稀释倍数
血球计数板的使用
以计数酵母菌为例
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数
二:酵母菌计数法的公式
测定微生物数量的 ***
(1)直接计数法:常用的是显微镜直接计数。
(2)间接计数法:常用的是稀释涂布平板计数法。
利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数 *** 。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的( 0.1mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称为总菌计数法。
三:酵母菌计数为什么要先盖后滴
说到微生物大家不免想到细菌、真菌等。“微者,小也”,微生物是观察一切微小生物的总称,所以必须借助显微镜来看清楚它的身材。有些微生物是有益的,而有些微生物的存在可引起多种应变性疾病和传染性疾病,会对人身体健康产生不良的影响。甚至,有些微生物还会使食品及原料腐烂和变质。对于微生物检测必须严格把关。
那么,我们常说的微生物都存在哪些方面呢?
首先要说的就是食品,食品因含有微生物可依赖生长的营养成分,因此食品会受到微生物不同程度的污染。食品质量安全关系到人民群众的身体健康,生命安全及社会经济。为了食品的安全,和人们的身体健康,微生物检测极其必要。
另外,医院也是不可忽视的。医院感染都和微生物有着极为密切的关系。加强医院的微生物检测,对于预防和控制医院感染有着非常重要的作用。
此外,就是我们每个人都离不开的空气。室内空气是微生物污染的重要传播途径。室内舒适的温度,湿度等环境条件以及相对密闭的室内更为各种有害微生物滋生创造了条件。只有有效地进行微生物检测,确定微生物的含量,才能采取有效的措施,从而保障人们的身体健康不受微生物的危害。
微生物检测 *** 都有哪些呢?
1、计数器测定法
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(0.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果,不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液,作一系列的倍比稀释,然后将定量的稀释液进行平板培养,根据培养出的菌落数,可算出活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的 *** ,也是目前国际上许多国家所采用的微生物检测 *** 。使用该法应注意:
①一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;;
②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入0.001%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC);
③本法限用于形成菌落的微生物。广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是常用的微生物检测 *** 。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。
5、测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重;干重法系单位体积培养物经离心后,以清水洗净放入干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。此法适于菌体浓度较高的样品,是微生物检测的一种常用 *** 。
6、测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分,含量较稳定,测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于浓度较高的微生物检测。